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和元生物技术(上海)股份有限公司(股票代码:688238)成立于2013年,是一家聚焦基因治疗领域的生物科技公司,专注于为基因治疗的基础研究提供基因治疗载体研制、基因功能研究、药物靶点及药效研究等CRO服务,为基因药物的研发提供工艺开发及测试、IND-CMC药学研究、临床样品GMP生产等CDMO服务。公司以“赋能基因治疗,共守生命健康”为使命,围绕病毒载体研发和大规模生产工艺开发,打造了基因治疗载体开发技术;基因治疗载体生产工艺及质控技术两大核心技术集群,建立了适用于多种基因药物的大规模、高灵活性GMP生产体系,向基因治疗领域提供:①质粒、腺相关病毒、慢病毒等载体产品;②溶瘤疱疹病毒、溶瘤痘病毒等多种溶瘤病毒产品;③CAR-T等细胞治疗产品的技术研究、工艺开发和GMP生产服务。基于公司自主搭建的分子生物学平台、实验级病毒载体包装平台、细胞功能研究平台、SPF级动物实验平台、临床级基因治疗载体和细胞治疗工艺开发平台、质控技术研究平台等全面的技术平台,依托公司已有的近5000平米研发中心、超10000平方米基因治疗载体GMP生产中心,以及在上海自由贸易试验区临港新片区建设中的77,000平方米精准医疗产业基地,公司将坚持以客户为中心、以提供专业服务为己任,打造国际领先的基因和细胞治疗CXO集团企业,加快基因治疗的基础研究、药物发现、药学研究、临床和商业化进程,推动基因治疗行业发展,造福人类健康!
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神经环路示踪

人阅读 发布时间:2017-08-31 19:57

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神经环路示踪

 

脑中神经元的连接非常复杂,完整而准确地显示神经元联系的解剖结构和功能连接,对理解脑的重要功能、揭示脑疾病的原因,以及寻找新的治疗方法具有重要意义。病毒载体 作为非常有效的环路示踪工具,正在被越来越多的研究应用。

图1 神经环路

基于病毒载体的神经环路示踪 ,通常需要考虑方向性和是否跨突触两大应用场景,而腺相关病毒(AAV)则是最常用的环路示踪工具病毒载体。

1.不跨突触的顺向和逆向标记

如下图所示,神经元是具有极性的细胞,信号从树突接收,通过整合后在轴丘发起动作电位,并通过轴突传递至下一级神经元。因此,胞体位置感染病毒后,在整个细胞表达基因的就是顺向标记(Anterograde) ;而在轴突末端感染,逆向转运到胞体表达的过程就是逆向标记(Retrograde)

下图为顺向不跨突触的AAV载体 应用示例:

下图为逆向不跨突触的rAAV2-retro病毒应用示例:

图4 rAAV2-Retro

2. 跨突触的顺向和逆向标记

在研究中,我们还会经常碰到需要跨突触标记,或操作的时候。狂犬病毒或伪狂犬病毒可以很好的实现逆向跨突触,但是其毒性非常大,难以应用在生理研究。

目前,应用于跨突触标记的低毒性病毒载体主要是AAV,其中顺向跨突触的AAV选择高滴度的AAV2/1,结合Cre-Loxp体系:

图6 Cre-loxp

逆向跨突触的AAV病毒策略如下:

总结一下,无论是顺向还是逆向,跨突触还是不跨突触,现在的AAV病毒载体均有相应的策略可以实现,欢迎随时联系我们交流。

其他相关应用

光遗传     化学遗传     神经环路示踪    钙离子成像     CRISPR/Cas9

Cre-LoxP     RNA干扰     基因过表达     microRNA表达    microRNA抑制

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