2022年5月25日，德国莱布尼茨研究所Tanja Maritzen和Volker Haucke研究团队借助转基因鼠模型、病毒载体介导的基因表达调控技术、分子生物学技术及成像技术等多种手段发现阿尔兹海默症风险因子CLAM可双向调控突触可塑性及调节学习能力的核心内吞机制。并在Science Advances杂志上发表研究论文，标题为：Selective endocytosis of Ca²⁺-permeable AMPARs by the Alzheimer’s disease risk factor CALM bidirectionally controls synaptic plasticity。 

首先，研究者分离小鼠的突触小体进行胰蛋白消化筛选，以识别突触后选择性富集的内吞蛋白。结果发现，CALM（网格蛋白装配淋巴样骨髓白血病蛋白） 作为一种内吞蛋白，选择性富集于AMPAR内吞发生的突触后区域。 

随后，特异性在皮层和海马兴奋性神经元中敲除CALM（CALM  KO^EMX小鼠）发现，经单次theta脉冲刺激（theta burst stimulation，TBS）后LTP显著增加；经低频刺激（LFS）诱导的LTD减少。免疫组化结果显示，特异性在皮层和海马兴奋性神经元中敲除CALM可导致部分含GluA1的AMPARs重新分配到神经元表面。

研究者借助AAV介导CALM在CALM敲除小鼠过表达，发现了CALM可特异性调控含GluA1的AMPARs表面水平。成像结果显示，CALM可选择性地促进GluA1在突触后膜的内吞作用，神经元缺失CALM则会导致海马神经元GluA1同体的内吞作用。提示了CALM通过选择性促进CP-AMPARs的内吞作用，在突触可塑性中起双向调控的作用。

借助Morris水迷宫发现，CALM  KO^EMX小鼠表现出更强的空间学习能力。这些提示了突触后富集的内吞蛋白CALM在LTD和LTP阶段发挥不同作用，并调节空间学习能力。

 最后，研究者探讨CALM介导GluA1同聚体内吞作用的分子机制，发现GluA1的内吞作用是由CALM介导的膜重构驱动的。CALM 通过依赖泛素结合结构域ANTH的识别选择性地促进泛素化CP-AMPAR 的内吞作用。提示了CALM和包含ANTH结构域的相关蛋白是决定CP-AMPARs表面水平，双向调控突触可塑性及调节学习能力的核心内吞机制。

和元生物可为研究者稳定提供文中使用AAV和慢病毒载体，助力基因表达调控技术！